可見(jiàn)分光光度計(jì)(又名可見(jiàn)光度計(jì)、分光光度計(jì))開(kāi)發(fā)出能夠進(jìn)行定量測(cè)量(標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)量,可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行濃度直讀)
分光光度法是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。
它具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn),是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的實(shí)驗(yàn)方法。許多物質(zhì)的測(cè)定都采用分光光度法。
在分光光度計(jì)中,將不同波長(zhǎng)的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時(shí),便可得到與不同波長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)的吸收強(qiáng)度。
如以波長(zhǎng)(λ)為橫坐標(biāo),吸收強(qiáng)度(A)為縱坐標(biāo),就可繪出該物質(zhì)的吸收光譜曲線。利用該曲線進(jìn)行物質(zhì)定性、定量的分析方法,稱為分光光度法,也稱為吸收光譜法。
用紫外光源測(cè)定無(wú)色物質(zhì)的方法,稱為紫外分光光度法;用可見(jiàn)光光源測(cè)定有色物質(zhì)的方法,稱為可見(jiàn)光光度法。它們與比色法一樣,都以Lambert-Bee定律為基礎(chǔ)。
物質(zhì)與光作用,具有選擇吸收的特性。有色物質(zhì)的顏色是該物質(zhì)與光作用產(chǎn)生的。即有色溶液所呈現(xiàn)的顏色是由于溶液中的物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收所致。
由于不同的物質(zhì)其分子結(jié)構(gòu)不同,對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收能力也不同,因此具有特征結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)集團(tuán),存在選擇吸收特性的大實(shí)收波長(zhǎng),形成大吸收峰,而產(chǎn)生*的吸收光譜。
即使是相同的物質(zhì)由于其含量不同,對(duì)光的吸收程度也不同。利用物質(zhì)所*的吸收光譜來(lái)鑒別物質(zhì)的存在(定性分析),或利用物質(zhì)對(duì)一定波長(zhǎng)光的吸收程度來(lái)測(cè)定物質(zhì)含量(定量分析)的方法,稱為分光光度法。
可見(jiàn)分光光度計(jì)常規(guī)的維護(hù)方法如下
分光光度儀器工作電源一般為220V,允許10%的電壓波動(dòng).,為了延長(zhǎng)光源使用壽命,在不使時(shí)不要開(kāi)光源燈,單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內(nèi)不能拆開(kāi),為防止色散元件受潮發(fā)霉,必須經(jīng)常更換單色器盒干燥劑。分光光度儀器維護(hù):
(1)分光光度儀器工作電源一般為220V,允許10%的電壓波動(dòng)。
(2)為了延長(zhǎng)光源使用壽命,在不使時(shí)不要開(kāi)光源燈。
(3)單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內(nèi)不能拆開(kāi),為防止色散元件受潮發(fā)霉,必須經(jīng)常更換單色器盒干燥劑。
(4)必須正確使用吸收池,保護(hù)吸收池光學(xué)面。
(5)光電轉(zhuǎn)換元件不能長(zhǎng)時(shí)間暴光,應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。